--> Archiwum Forum
Drozdi [ Żunior ]
Biochemia - sączenie molekularne :|
Witam
Osoby które sie w tym obracają/ły w tym temacie bedą wiedzieć o co chodzi, więc nie będe sie rozwlekał nad tłumaczeniem.
Chodzi mi o sączenie molekularne. Nie było mnie przy tym doświadczeniu, a mam teraz raport napisac i zachodze w głowe co czym jest :/
Mam rozpuszczalnik dichromian potasu. Wiem jedynie, że objętość słupa żelu wynosi 9,4cm3, objętość dodanego rozpuszczalnika 1cm3 i że po przesączeniu było go 3,9cm3(1cm3 +2,9cm3 H2O). I nie wiem czy dobrze wnioskuje:
Vg=9,4 -objętość słupa żeli
Vi=3,9 -objętość wewnętrzna, czyli objętość rozpuszczalnika wypelniającego wszystkie ziarna żelu
Vo=1-objętość swobodna, czyli objętość rozpuszczalnika zalegającego między ziarenkami żelu (objętość zerowa)
Vt=14,3
Ve=4,9
Kd=bliski 1 -współczynnik podziału
wzory:
Ve=Vo+Vi*Kd
Vt=Vo+Vi+Vg
wiem, student powinien sobie poradzić, ale może ktoś to miał ostatnio i ma poprawnie napisane (tak, wiem, żyje złudną nadzieją:p)
Minas Morgul [ Adenosine triphosphate ]
Ja sączenie molekularne będę miał dopiero za dwa ćwiczenia, więc niestety nie mogę Ci pomóc, a mój kolega jest nieobecny (zrobił już biochemię rok temu).
Musisz to zrobić na poniedziałek?
Bo jeśli nie, to zobacz książkę Autorstwa bodajże Kłyszejko Stefanowicz, ćwiczenia z biochemii. Jest tam mnóstwo niepotrzebnego shitu, ale to, co istotne powinieneś jakoś wyłapać.
Albo jak kolega wróci, to poproszę go, żeby się tu wypowiedział.
A i jeszcze są podstawy chromatografii Witkiewicza.
Szukaj tego bodajze pod nazwą "chromatografia wykluczania".
Drozdi [ Żunior ]
na poniedziałek na 15, więc troche czasu jeszcze jest. Chociaż chciałbym miec to już za sobą ;] To jakbys Minas Morgul spotkał sie z tym kolegą to zapytaj o to sączenie. Może akurat bedzie coś z tego pamiętał :)
Minas Morgul [ Adenosine triphosphate ]
Wiesz co, przeczytałem to sobie, jak tu jest u nas.
U nas wygląda to tak, że do sączenia molekularnego używamy Sephadexu o objętości 10-12 centymetrów.
U nas wygląda to tak, że Blue Dextran 2000 przełazi pomiędzy porami i pojawia się z wycieku z kolumny chromatograficznej szybciej, niż badany związek. W twoim wypadku jest to owy dichromian potasu. U mnie żelazicyjanek potasu. Tylko teraz co jest u Ciebie tym, czym u mnie dextran?
Ja to rozumiem w ten sposób, że to, co jest we frakcji pierwszej to jest to w moim wypadku objętość shitu, który zszedł przed pierwszą barwną kroplą i to w moim i w Twoim wypadku jest Vo.
Rozbieżności pojawiają się w tym, że w moim skrypcie nie ma nic na temat liczenia tego, więc zakładam, że wzory, które tam masz są poprawne. Rozbieżnością jest np. to, że mam napisane, że okej - objętość kolumny do pojawienia się w nim bluedextran (czyli związek niepenetrujący do ziaren) to Vo - czyli objętość pusta kolumny. A z kolei u mnie Vt to objętość całkowita kolumny także, ale jakoś śmiesznie zdefiniowana, bo tutaj mam napisane, że jest to objętość wycieku do momentu pojawienia się w nim żelazicyjanku. Czyli tak, jakby się tego żelazicyjanku nie brało pod uwagę, a w Twoim wzorze się to uwzględnia, bo jest Vi jak nic.
Moim zdaniem, to co masz jest okej (nie wypowiadam się odnośnie Ve, bo o tym na zajęciach będę miał), o ile wzór na Vt jest poprawny.
Niestety teraz muszę wracać do swojej roboty, ale gdzieś mi się te wzory przemknęły w Stryerze. A tą książkę pewnie masz, to sobie sprawdź.